—首頁— 公司概況 新聞資訊 產品展示 科研開發 應用案例 銷售網絡
聯系我們
   
 
 

相關內容

研究紫草素抑制白色念珠菌的材料和...
有關紫草素抑制白色念珠菌的討論
病毒DNA在感染中的作用
幽門螺桿菌的根除方法
新生隱球菌的有性生殖和減數分裂過...
蛋白質組學在布魯氏菌病鑒別診斷中...
幽門螺桿菌在胃部存活的分子機制
腸道微生物體外培養技術
腸道微生物組有助于維持宿主代謝節...
腸道微生物或能預防敗血癥
大腸菌群代謝氨基酸的產物
腸道中氨基酸的脫羧基作用可產生胺...
食肉細菌或能對抗超級病菌
口腔微生物與腸道微生物的關系
有效微生物群(EM)在健康養豬業...
 

蛋白質組學在布魯氏菌病鑒別診斷中的作用

日期:2018/3/26 11:54:23 點擊次數 3779 發布單位:天義生物谷  錄入:李清

摘要:蛋白質組學,特別是免疫蛋白質組學在布魯氏菌病研究中最為重要的作用是在鑒別診斷方面。

對于布魯氏菌病的鑒別診斷來說,主要包括兩方面的研究方向。一是布魯氏菌病與其他存在血清學干擾的疾病的鑒別診斷,如小腸結腸炎耶爾森氏菌 O9 (Yersinia enterocolitica O:9)、大腸桿菌 O157 等;另一方面是布魯氏菌不同種屬之間或者疫苗株與野毒株之間的鑒別診斷。

在2006年通過2-DE 和質譜分析對布魯氏菌1119-3 全菌蛋白進行鑒定,結合兔布魯氏菌高免血清共篩選到17個免疫原性蛋白,應用MALDI-MS 和 nLC-ESI-MS 方法鑒定出兩個布魯氏菌特異性蛋白, BCP31 和 SOD。這兩個蛋白均可以與小腸結腸炎耶爾森氏菌 O9、城市沙門氏菌 N 群(Salmonella urbana group N)、霍亂弧菌(Vibrio cholerae)和土拉弗朗西斯 LVS 菌(Francis tularensis LVS)進行區分。

對布魯氏菌RB51疫苗株與小腸結腸炎耶爾森氏菌O9、大腸桿菌O157使用免疫蛋白質組學的方法進行區分,共鑒定篩選出10個只與RB51株具有反應性的蛋白點,分別是銅/鋅超氧化物歧化酶、組氨醇脫氫酶、DnaK伴侶蛋白、GroES伴侶蛋白、輔酶A硫解酶、雙組分應答調控因子、細胞分裂蛋白FtsZ、醛脫氫酶、50S核糖體蛋白L10和侵襲蛋白B等。

通過分別提取布魯氏菌疫苗株 S19、RB51 和一株野毒株的外膜蛋白后進行分析,使用制備的抗上述3個菌株的水牛血清對其進行Western blot 驗證,發現僅在野毒株中存在的大小為151.3 kD 的外膜蛋白。

隨后,分別使用布魯氏菌感染牛血清、免疫牛血清和陰性血清對提取的布魯氏菌S19內組分進行鑒定,分別發現大小為 10、12 和 17 kD 的 3 個潛在用于鑒別診斷的蛋白質靶點,并對其中的 56 個蛋白質點進行進一步篩選,27 個蛋白質點對于免疫血清和自然感染血清存在差異;質譜分析發現,布魯氏菌 S19 株上的 5 個蛋白與自然感染的血清存在特異性反應。

 2016 年,Wareth 等對分離自田間的兩株牛種布魯氏菌和羊種布魯氏菌進行蛋白質組學鑒定,發現分別有 63 個和 103 個蛋白是牛種和羊種布魯氏菌所特有的;使用不同感染動物(奶牛、水牛、山羊、綿羊)的布魯氏菌陽性血清進行免疫蛋白質組學分析,其中牛種布魯氏菌 25 個蛋白有特異性的免疫反應,羊種布魯氏菌則有20個;牛種布魯氏菌內的二氫吡啶二羧酸合成酶、3-磷酸甘油醛脫氫酶和乳酸/丙酮酸脫氫酶,羊種布魯氏菌內的 ABC 氨基酸轉運蛋白底物結合蛋白以及兩株菌共有的延胡索酰乙酰乙酸水解酶則與所有的陽性血清均存在反應。

上述研究對于揭示不同狀態下機體對于免疫/感染后的免疫應答和鑒別自然感染與免疫狀況均具有重要意義。本實驗室使用布魯氏菌S2疫苗株的膜蛋白對免疫和感染的山羊血清進行免疫蛋白質組學和免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation)鑒定,共篩選到 10 個候選蛋白,并對這10個蛋白通過原核表達系統進行表達純化,初步建立了基于間接ELISA手段上的鑒別診斷方法。

蛋白質組學作為組學研究中的重要一環,對于揭示蛋白質對于機體的影響具有重要意義,也為闡明疾病的致病機理和有效治療提供了理論依據和解決途徑,為疾病的早期診斷提供了分子標識。布魯氏菌作為胞內寄生菌,其調動免疫逃逸機制后對于宿主和自身內部蛋白質表達的變化相較于其他細菌來說更加明顯,所以蛋白質組學方法對于布魯氏菌病的研究具有重要意義。

但是,布魯氏菌無論是在致病特點還是在蛋白組成等方面都遠比病毒等復雜,因此對其蛋白質組學的研究相對較少;而且現有的研究結果所篩選和鑒定得到的多是與調節物質代謝、能量轉運和酶類激活等有關的蛋白,這些蛋白的改變是因為布魯氏菌本身變化引起還是由于機體對于免疫/感染后產生的非特異性應答還需要進一步證實。另外,由于雙向電泳等技術限制,其結果的重復性較差,需要在研究時同時做平行試驗以保證結果的真實性?傊,蛋白質組學的引入對于更好地掌握布魯氏菌的致病機制以及有效預防和治療布魯氏菌病提供了理論支撐。隨著蛋白質組學相關技術的進一步發展,其在布魯氏菌病研究上的應用將會更加完善和成熟。

 
-- 關于本站 -- 資料下載 -- 友情鏈接 -- 聯系我們 -- 人才招聘 --
 
Copyright(C)2002—2019 河南中廣集團.天義生物谷 All Rights Reserved 豫ICP備09012065號
聯系電話:0371-65805200 移動電話:13938592527
鄭州市鄭東新區龍子湖高校園區(河南牧業經濟學院)
正版星力捕鱼九代游 上海快3走势图表 赛车下载 上海福彩时时乐开奖号码 中国最大的股票配资平台 现金娱乐 南京晓晓期货配资 2020年七星彩开奖结果 一分钟快三的玩法技巧 如何购买股票操作流程 11167期排列3走势